細(xì)胞染色是以細(xì)胞形念學(xué)為基礎(chǔ),結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)做定性定位和半定量分析的方法。細(xì)胞染色常用的三種方法巴氏染色法、瑞特—吉姆薩染色法、蘇木精—伊紅染色法,下面我們來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō)。
(1)巴氏染色法:本法染色特點(diǎn)是細(xì)胞具有多色性顏色,色彩鮮艷多彩。涂片染色的透明性好,胞質(zhì)顆粒分明,胞核結(jié)構(gòu)清晰,如鱗狀上皮過(guò)度角化細(xì)胞胞質(zhì)呈橘黃色;角化細(xì)胞顯粉紅色;而角化前細(xì)胞顯淺綠色或淺藍(lán)色,適用于上皮細(xì)胞染色或觀察陰道涂片中激素水平對(duì)上皮細(xì)胞的影響。此方法的缺點(diǎn)是染色程序比較復(fù)雜。
?。?)瑞特—吉姆薩染色法(wrightgiemsa atain);本方法多用于血液,骨髓細(xì)胞學(xué)檢查。胞質(zhì)內(nèi)顆粒與核安危質(zhì)結(jié)構(gòu)顯示較清晰。操作簡(jiǎn)便。
?。?)蘇木精—伊紅染色法(hemotoxylin eosin,HE):該方法染色透明度好,核與胞質(zhì)對(duì)比鮮明。染色步驟簡(jiǎn)便,效果穩(wěn)定。適用于痰液涂片,觖質(zhì)核呈紫藍(lán)色,胞質(zhì)淡玫瑰紅色,紅細(xì)胞呈淡朱紅色。
細(xì)胞染色的基本原理:酶標(biāo)抗體與熒光色素標(biāo)記抗體的染色相同,亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標(biāo)記在每一抗體上,間接法是將酶標(biāo)記在第二抗體上,檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的特定抗原物質(zhì)。間接法所用的抗體是對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)某種抗原的特異性抗體(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而絕大數(shù)單克隆抗體系由小鼠制備);第二抗體則為抗體(家兔/小鼠的IgG)的抗體。所以,只要不同的抗體均來(lái)自同一種屬,同一標(biāo)記的第二抗體就能用來(lái)顯示其不同特異性抗原的存在,這樣可避免了直接法中標(biāo)記每一種抗體的麻煩,并且提高了方法的敏感度。目前的ICC染色中,以間接法為常用。