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      BCA法蛋白含量測定試劑盒說明書
      更新時間:2020-07-06 點擊量:2034

      BCA法蛋白含量測定試劑盒說明書 

      微量法

      注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定,確保蛋白濃度在20-2000μg/ml內(nèi)。

      貨號YX-W-C202

      規(guī)格100T/96S

      產(chǎn)品內(nèi)容

      試劑A:液體×1瓶,4℃保存。 

      試劑B:液體×1支,4℃保存。 

      標準品:液體×1支,4℃保存。 

      產(chǎn)品說明

      樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。 測定原理: 堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+2分子的BCACu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰ziui qiang。 自備儀器和用品: 

      臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。 

      工作液配制:臨用前請根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×0.2mL),將試劑AB按照501的比例混合,蓋緊后充分混勻。 

      操作步驟:

      一、樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/span> 

      1. 液體樣品:澄清液體樣品可以直接測定。 

      2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水),冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋) 

      3. 細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000rpm,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。 

       

      二、測定操作: 

      1. 可見分光光度計/酶標儀預熱30min,調(diào)節(jié)波長到562 nm,蒸餾水調(diào)零。

      • 工作液置于60℃水浴預熱30 min。

       

       空白管 

      標準管 

      測定管 

      蒸餾水(μL 

      4

       

       

      標準品(μL 

       

      4

       

      待測液(μL 

       

       

      4

      工作液(μL 

      200

      200

      200

      混勻后置于60℃保溫30min,于微量玻璃比色皿/96孔板,于562nm處測定吸光值A(chǔ),分別記為A空白管、A標準管、A測定管。

      注意:空白管和標準管只需要做一次。 

      三、計算公式: 

      Cpr (mg/mL)= C標準品×A測定管-A空白管)÷A標準管-A空白管) 

      =0.5×A測定管-A空白管)÷A標準管-A空白管)

      注意事項:

      • BCA 法蛋白含量測定試劑盒,適用于測定蛋白濃度在20-2000μg/ml 樣品。測定前取1-2 個樣做預實驗,樣品蛋白含量太高的話,請稀釋至相應(yīng)濃度范圍內(nèi),以確保測定的準確性。 
      • 待測樣品蛋白提取可用生理鹽水、蒸餾水或PBS 提取。 
      • 由于受測定溫度及時間等的影響,請嚴格按照給定條件測定。

       

      本產(chǎn)品僅供科學研究使用!請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途!

       

       

      實驗代做服務(wù):

      ELISA試劑盒免費代檢測

      CCK8檢測

      基因組DNA提取

       

      蛋白相互作用分析

      Western Blot

      免疫組化

      熒光定量PCR

      動物模型服務(wù)

      流式細胞檢測

      ROS氧化分析

      激光共聚焦

      DNA甲基化實驗

      細胞劃痕

      鈣離子濃度檢測

      掃描電鏡實驗

      microRNA測序

      動物實驗

      探針合成

      ATP/ADP檢測

      石蠟/冰凍切片

      定點突變

      線粒體膜電位(MMP)檢測

      細胞生長曲線的測定

      藥理毒理動物實驗

       

      免疫共沉淀

      真核表達載體構(gòu)建

      染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

      非標定量(Label-free)實驗

      滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

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