法氏囊抗體檢測(cè)可溶性抗原和抗體的可以在瓊脂凝膠中擴(kuò)散，當(dāng)抗原、抗體相遇時(shí)發(fā)生特異性結(jié)合，在較適處發(fā)生沉淀，此沉淀物因顆粒較大而不擴(kuò)散，形成肉眼可見的白色沉淀帶。
 

　　法氏囊抗體檢測(cè)的材料與試劑：
 

　　普通瓊脂平板、打孔器、針頭、加樣槍、槍頭、V型血凝板、玻璃板、生理鹽水
 

　　雞法氏囊陽(yáng)性血清、法氏囊標(biāo)準(zhǔn)抗原、待檢卵黃抗體/血清
 

　　法氏囊抗體檢測(cè)的方法：
 

　　1.瓊脂板的制備：
 

　　1g優(yōu)質(zhì)瓊脂溶于含0.1%石炭酸的8%氯化鈉溶液100ml。用時(shí)倒在平皿內(nèi)或置于玻片上，瓊脂厚度2.5~3mm。
 

　　2.打孔：
 

　　用打孔器在瓊脂平板上打孔，中央1個(gè)孔,周圍6個(gè)孔，形成梅花形圖案。
 

　　要求：孔徑4mm，孔距3mm。
 

　　3.挑出孔內(nèi)瓊脂。
 

　　4. 封底：在火焰上緩緩加熱，使孔底的瓊脂略熔化封底，避免加樣后液體從孔底滲漏。
 

　　5.卵黃液進(jìn)行倍比稀釋。
 

　　V型板先在一排每孔加生理鹽水50μl，再在一孔加50μl的卵黃液, 反復(fù)吹吸3次后，吸50μl混和液加入第2孔，吹吸混勻，依次倍比 稀釋至第4孔……較后一孔吸50μl棄去，這樣1至4孔的抗體稀釋倍數(shù)依次為1:2、1:4、1:8和1:16……。
 

　　6.加樣：
 

　　在中心孔加法氏囊標(biāo)準(zhǔn)抗原約50μl。第1孔加法氏囊標(biāo)準(zhǔn)陰性血清；第2孔加法氏囊標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清。3、4、5、6孔分別加原液、1:2、1:4、1:8、1:16……的待檢卵黃液。每孔以加滿為度。
 

　　7.加畢后，蓋上平皿蓋，將平皿翻過來，置濕盤中，在37℃下自由擴(kuò)散24-48小時(shí)。
 

　　結(jié)果判定：
 

　　若待檢血清與抗原孔之間出現(xiàn)白色沉淀線，則表示陽(yáng)性，若不出現(xiàn)沉淀線，為陰性。
 

　　若用于檢測(cè)血清效價(jià)，則以出現(xiàn)沉淀線的血清較高稀釋倍數(shù)表示(2n)。
 

　　用于兩種抗原比較時(shí)，沉淀線有多種情形，應(yīng)具體分析。