腹瀉病毒抗體實(shí)驗(yàn)盒由預(yù)包被豬流行性腹瀉病毒(PEDV)重組N蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬流行性腹瀉病毒抗體。
腹瀉病毒抗體實(shí)驗(yàn)盒的樣本處理及要求:
1.產(chǎn)品僅用于科研血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(000-3000轉(zhuǎn)1分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3.腹瀉病毒抗體檢測(cè)試劑盒尿液: 用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)1分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS (PH7.2-7.4) 稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)1分) 。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入-定量的PBS, PH7 .4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-89C的溫度。加入一定量的PBS (PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于20°C保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
7.產(chǎn)品僅用于科研不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP) 活性。