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      微囊藻毒素ELISA試劑盒說明書

      微囊藻毒素ELISA試劑盒說明書

      產品型號:

      所屬分類:人的ELISA

      產品時間:2024-08-27

      簡要描述:微囊藻毒素ELISA試劑盒--打折銷售中,請!

      詳細說明:

      微囊藻毒素ELISA試劑盒說明書

      本試劑盒僅供研究使用。

      1 使用目的:

      本試劑盒用于各種水樣、血液中微囊藻毒素(Microcystin)殘留的定量檢測。

      2 實驗原理

      本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有微囊藻毒素(Microcystin)偶聯(lián)抗原,加入微囊藻毒素(Microcystin)標準品或樣品,游離微囊藻毒素(Microcystin)與微孔條上預包被的微囊藻毒素(Microcystin)偶聯(lián)抗原互相競爭微囊藻毒素(Microcystin)抗體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在450nm波長下進行檢測,吸光值與樣品中微囊藻毒素(Microcystin)含量成反比,通過標準曲線計算樣品中微囊藻毒素(Microcystin)的含量。  

      3 試劑盒組成

      3.1 預包被的微囊藻毒素(Microcystin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標板:1塊(12×8條)。
      3.2
      微囊藻毒素(Microcystin)標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ug/L, 0.1ug/L,0.3ug/L,0.9ug/L,2.7 ug/L,8.1 ug/L

      3.3微囊藻毒素(Microcystin)抗體酶結合物:1瓶(6ml)。
      3.4
      顯色液A1瓶(6ml)。
      3.5
      顯色液B1瓶(6ml)。
      3.6
      終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
      3.7
      樣本稀釋液:1瓶(10×,  6ml),用于樣品稀釋用。
      3.8
      濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
      3.9
      說明書一份。


      4 需要而未提供的材料
      4.1
      設備
      4.1.1
      波長450nm酶標儀。
      4.1.2
      粉碎機。

      4.1.3
      量筒。
      4.1.4
      振蕩器。
      4.1.5
      漏斗。
      4.1.6Whatman
      或相當?shù)臑V紙。
      4.1.7
      微量移液器。
      4.2
      試劑
      4.2.1
      去離子水或蒸餾水。
      4.2.2
      甲醇。
      5
      貯存
      5.1
      試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍
      5.2
      未用完的微孔板應該密封干燥保存
      6
      注意事項
      6.1
      使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
      6.2
      不要使用過期試劑盒。
      6.3
      試劑盒使用前,將試劑恢復至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。
      6.4
      標準品中含有微囊藻毒素(Microcystin),使用時應特別注意,操作時應帶手套。
      6.5
      終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
      6.6
      不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結果。
      6.7
      不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實驗結果。
      6.8
      稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結果
      6.9
      混合試劑時應避免起泡。
      7
      工作液準備
      7.1
      微囊藻毒素(Microcystin)標準品溶液:0ug/L, 0.1ug/L,0.3ug/L,0.9ug/L,2.7 ug/L,8.1 ug/L

      7.2 濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用

      7.3 樣本稀釋液:備用
      7.3
      顯色劑:已備用,避免光線直照
      7.4
      反應終止液:已備用
      8 樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應準確稀釋,否則會出現(xiàn)結果不準確,樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
      8.1
      10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
      8.2
      強力振蕩3分鐘
      8.3
      Whatman 濾紙過濾
      8.4
      100µl處理后的樣品,加入400µl樣本稀釋液
      8.5
      50μl稀釋液進行分析(稀釋倍數(shù)10

      9
      酶免分析步驟
      9.1
      實驗須知
      9.1.1
      實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(25±2℃),時間約2小時?;販刂潦覝兀?/span>25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
      注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準確度。
      9.1.2
      使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
      9.1.3
      請不要改變分析程序
      9.1.4
      請使用精確的微量移液器
      9.1.5
      操作一旦開始,請不要中斷任何程序
      9.1.6 ELISA
      結果的可重復性極大程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作
      9.1.7
      為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣
      9.1.8
      加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內表面
      9.2
      分析步驟
      9.2.1
      預先進行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,推薦進行雙孔檢測
      9.2.2
      取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
      9.2.3
      樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液蒸餾水或去離子水稀釋
      9.2.4
      B0孔中加入50µl0.0 ug/L標準品溶液

      9.2.5
      在各標準孔中加入50μl的標準品溶液
      9.2.6
      在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
      9.2.7
      在所有孔中加入50µl的抗微囊藻毒素(Microcystin)抗體酶結合物
      9.2.8
      輕輕晃動反應板幾秒鐘。
      9.3 37
      ℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)

      9.3.1
      甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
      9.4
      反應
      9.4.1
      洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應板使之*混勻
      9.4.2 37
      ℃溫浴10min
      9.4.3
      每孔中加入50µl終止液,混勻

      9.4.4
      450nm下檢測吸光度,結果在5min內讀取。
      10
      結果計算
      10.1
      定量分析
      10.1.1
      所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標準(0標準)的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
      B—
      標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
      B0—0 ug/L
      標準溶液的平均吸光度值
      10.1.2
      以微囊藻毒素(Microcystin)濃度的對數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標準曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應點的橫坐標,即為微囊藻毒素(Microcystin)濃度的對數(shù)值,求得反對數(shù)即為測定液中微囊藻毒素(Microcystin)濃度Cug/L
      10.1.3
      由于樣品經過了預先稀釋,因此根據(jù)標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。
      10.2
      半定量測定

      10.1.1
      目測半定量測定:首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行,根據(jù)樣品與標準品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。
      10.1.2
      儀器半定量測定:首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行,根據(jù)樣品與標準品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。


      11 特異性
      物質 交叉反應
      微囊藻毒素(Microcystin) 100%


      12 試劑盒參數(shù)
      本試劑盒檢測下限為0.1 ug/L
      B0
      吸光度*值應大于
      1.0
      試劑盒吸光度板內誤差小于8%,板間誤差小于15%。

      用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。
      13
      標準曲線模式(僅供參考)
      試劑盒提供的標準曲線范圍為0.1ug/L ~8.1ug/L。


      14 分析限制
      本試劑盒檢測為陽性的樣品應該用另一種方法如HPLCGC/MS加以確證。


       

       

              大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒說明書

       

       



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